PCR实验室,也叫临床基因扩增实验室,是专门用于检测艾滋病、乙型肝炎、禽类和其他感染性疾病的实验室。整理了 PCR实验室的施工规范,并附上 PCR实验室仪器设备清单,供大家参考~
用 PCR方法扩增包含在病毒体内的基因,可以检测感染者体内是否含有某种病毒。该法具有灵敏、特异、快速、对样品要求低等优点,因而受到广泛的重视。PCR实验已广泛应用于临床诊断,各防疫检测部门对禽类疾病的诊断。
但这类实验需要有安全的环境、合理配置的实验室、规范的操作。近几年, PCR实验室的建设越来越规范和重视。
本论文从基因扩增检测实验室的平面布置、空调通风系统设计、气流控制、污染防治等几个方面阐述了实验室设计中的主要特点,并附上了 PCR实验室常用设备清单。
一、 PCR实验室平面布置
临床基因扩增检测实验室原则上分为四个独立的工作区:试剂准备区、制样区、扩增反应混合物配制和扩增区、产物分析区。为了避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格沿一个单一的方向进行,即只能从试剂贮存与准备区→标本制备→扩增反应混合物配制和扩增反应区→产物分析区。
在实验区域间,应采用传送窗将试剂和样品传送。
二 PCR实验室的空调通风系统与压力控制
PCR实验室没有严格的净化要求,但为了避免各试验区间可能出现交叉污染,建议采用全送全排气流组织。与此同时,应严格控制送、排风量,保证各试验区的压力要求。
1、 PCR实验室试剂储藏及准备区
试验区主要进行的操作是:贮存试剂的准备、试剂的分装、主反应混合液的制备。
对于气流压力的控制,本区并无严格要求。
2、 PCR实验室的标本制备区域
在这一地区主要进行的操作包括临床标本的保存、核酸(RNA、 DNA)的提取、储存以及添加到扩增反应管中 cDNA的合成。
3、 PCR实验室扩增反应混合物的配制及扩展区
本区操作以 DNA或 cDNA扩增为主。
4、 PCR实验室扩增产物分析区
在这一地区主要进行的是扩增片段的测定。如果用全自动封闭分析仪器检测,这个区域可以不设。
三、 PCR实验室污染防治措施
PCR实验室设计的核心是如何防止污染。实践中,污染主要表现为:扩增产物的污染、天然基因组 DNA的污染、试剂污染和标本间的污染。因为当污染发生时,实验必须停止,直到找到污染源为止,并且结果必须无效,需要重新进行实验。因此出现污染后再围绕实验室寻找污染源不仅费时又麻烦,浪费人力物力。所以要避免污染,首先应该是预防,而非排除。
1.严格划分工作区域
2.系统的合理设置
3.标准操作
4、严苛管理
5、实验室配套齐全